Высота

Паразиты и переносчики, том 16, Артикульный номер: 299 (2023) Цитировать эту статью

85 доступов

2 Альтметрика

Подробности о метриках

Шесть видов апикомплексных паразитов рода Babesia, а именно B. microti, B. divergens, B. duncani, B. motasi, B. crassa-like и B. venatorum, считаются основными возбудителями бабезиоза человека в эндемичных условиях. области. Эти шесть видов обладают различной степенью вирулентности для своих основных хозяев. Следовательно, точная идентификация этих видов имеет решающее значение для принятия соответствующих терапевтических стратегий.

Мы разработали метод ПЦР в реальном времени с плавлением высокого разрешения (qPCR-HRM), нацеленный на ген 18S рибосомальной РНК пяти видов Babesia. на основе температуры плавления (Tm) и процентных значений достоверности генотипа. Затем этот подход был оценен с использованием 429 образцов крови, взятых у пациентов с укусами клещей в анамнезе, 120 образцов ДНК, смешанных с плазмидами, и 80 образцов лабораторно инфицированных животных.

Чувствительность и специфичность предложенного метода qPCR-HRM составляли 95% и 100% соответственно, а предел обнаружения составлял 1–100 копий плазмиды с клонированным целевым геном. Уровень обнаружения зависел от анализируемого вида бабезий. Праймеры, разработанные в этом исследовании, обеспечили не только высокую межвидовую специфичность предложенного нами метода, но и высокую универсальность для разных изолятов одного и того же вида по всему миру. Кроме того, Tm, полученный из приготовленного стандарта плазмиды, теоретически пригоден для идентификации изолятов всех известных последовательностей пяти видов бабезий.

Разработанный метод выявления представляет собой полезный инструмент для эпидемиологического расследования бабезиоза человека и предтрансфузионного скрининга.

Бабезиоз человека, вызываемый видами Babesia, представляющими собой кровяные простейшие, принадлежащие к семейству Babesiidae (отряд Piroplasmida; Phylum Apicomplexa) [1], является вновь возникающим клещевым заболеванием. Случаи заражения бабезиями, передающиеся при переливании крови и приобретаемые естественным путем, у людей представляют собой серьезную проблему общественного здравоохранения и в последние годы часто регистрируются во всем мире [2, 3]. Возбудители бабезиоза человека передаются преимущественно через укусы клещей и переливание крови и редко перинатальным путем и при трансплантации органов [4,5,6,7,8]. К настоящему времени во всем мире идентифицировано более 100 видов бабезий [9].

Виды бабезий. Ранее считалось, что вирус заражает только диких и домашних животных. Однако в 1957 году первый случай заражения человека бабезией был зарегистрирован в Югославии [10], и это заболевание постепенно превратилось в новое глобальное паразитарное заболевание человека, потенциально представляющее угрозу для здоровья людей с более слабой иммунной системой. Шесть видов бабезий, а именно B. microti, B. venatorum, B. divergens, B. duncani, B. motasi и B. crassa-like, хорошо известны как основные возбудители бабезиоза человека [11, 12]. Большинство случаев бабезий в США вызвано B. microti в районах, где заболевание является эндемичным, но B. duncani и B. divergens также распространены в США [13]. В Европе B. divergens в основном встречается во Франции и Ирландии [12, 14], B. venatorum зарегистрирован в Австрии, Германии, Италии и Швеции [14,15,16], а также сообщалось об инфекциях, подобных B. crassa. в Словении и Франции [17, 18]. В Азии B. venatorum и B. crassa-like встречаются преимущественно в Китае [19, 20]. Однако случаи B. microti были зарегистрированы на юго-западе Китая вдоль границы с Мьянмой, на Тайване и в Японии [21,22,23,24,25]. Штамм Babesia motasi KO1 (DQ3466955) распространен в Корее [12, 26]. Последовательности B. motasi KO1 и Babesia sp. Штаммы KCDC-1 (MK930513), выделенные от двух случаев заболевания человека в Южной Корее, показали большое сходство с последовательностью штамма B. motasi hebeiensis в Китае [26]. Также было замечено, что B. duncani, о которой впервые сообщили в штате Вашингтон, США, теперь широко распространена в Канаде [27,28,29].